巴氏染色液細胞核著色過淺，鹽酸分化時間過長或蘇木素染液時間過長。需要縮短分化時間或延長堿化時間；每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配制蘇木素液。在固定之前制片干燥。所以對巴氏染色的制片需要嚴(yán)格遵守濕固定的原則。自來水的PH值偏酸性。使用堿性溶液。細胞核著色過深。鹽酸溶液濃度不夠。適當(dāng)加入幾滴鹽酸以增加濃度。制片用高于95%以上濃度的酒精固定后可以出現(xiàn)染色過深。應(yīng)用95%酒精固定。

透明過程:

  巴氏染色液染色的zui后一步是透明，使細胞的色度與細胞的重疊不致影響鏡下檢查。這是在脫水與制片封固之間的一項重要步驟。zui常用的透明溶劑使二甲苯，二甲苯的折射率在1.494，載玻片的折射率在1.515，兩者較為匹配。如果二甲苯溶液出現(xiàn)顏色或變得渾濁，一定要更換新液。 　巴氏染色操作流程 95%乙醇固定（15min）→清水沖洗多次→蘇木素染液（3-5min）→清水沖洗三次→藍化→95%乙醇漂洗→橙黃染液（1-10s）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50（3-5m）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→無水乙醇漂洗→無水乙醇（2min）→二甲苯（2min）→中性樹膠封片。

胞漿染色:

  巴氏染色液胞漿染色在巴氏方法中亦稱為OG—EA染色，它包括橘黃G（OG）和EA兩部分染色。由于橘黃G是一種小分子染料，能夠很快地作用于胞漿，一般染色時間不宜過長，通常1-2min。對于宮頸、陰道上皮中非正常角化細胞和角化型鱗癌細胞的胞漿中都可以出現(xiàn)鮮艷的橘黃色.封固制片,封固制片對于避免空氣干燥的影響，制片經(jīng)長期存放不褪色是非常重要的.一般使用24mm×50mm或24mm×60mm的蓋玻片，用二甲苯調(diào)配的中性樹膠進行封固.